cns,pirb的功能和下游抑制性信号通路仍然未被阐明,因此迫切需要pirb的细胞和动物模型。目前对于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制剂,或者采用慢病毒转染。前者受到是否能够透过血脑屏障和抑制剂效率的影响,后者慢病毒转染在原代细胞和在体的转染效率比较低,使研究pirb的功能受到极大的限制。为解决这些问题,我们通过crispr/cas9技术建立了pirb基因敲入小鼠,将pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位点,为研究pirb在免疫系统或者神经系统的作用和机制提供了很好的工具。技术实现要素:本发明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠动物模型。什么是疾病动物模型建模?浦东新区疾病动物模型建模供应商
有助于更地认识疾病的本质临床研究未免带有一定的局限性。已知很多病身体除人以外也能引起多种动物,其表现可能各有特点。通过对人畜共患病的比较研究,可以充分认识同一病原体(或病因)对不同机体带来的各种损害。因此从某种意义上说,可以使研究工作升毕到立体的水平来揭示某种疾病的本质,从而更有利于解释在人体上所发生的一切病理变化。动物疾病模型的另一个富有成效的用途,在于能够细致地观察环境或遗传因素对疾病发展的影响,这在临床上是办不到的,对于地认识疾病本质有重要意义。静安区呼吸疾病动物模型建模很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值。
疾病动物模型是指医学研究中建立的具有人疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。关于动物模型的研究就是有关实验动物的应用科学,研究各种模型动物的生物学特性和疾病特点,进而研究动物疾病发展过程。实验动物模型的建立,是用人为的方法,使动物在一定的治病因素(物理的、化学的、生物的)作用下,造成动物组织、或全身一定程度损害,出现某些类似动物疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病,通过这种手段来研究动物疾病的发生、发展规律,为研究动物疾病的预防、(包括新药物试用)提供理论依据。
腰椎间盘突出是造成全球大部分地区工作缺失和活动受限的主要疾病,随着日常生活节奏的不断加快,腰椎间盘突出症已经成为临床脊柱外科的常见病和多发病,而且发病人群越来越呈现年轻化及普遍化的趋势。该病主要是由于腰椎长期的受力不均或突然性外伤,导致腰椎纤维环出现变形、破裂,纤维环、髓核及软骨终板单独或同时外突,从而压迫到坐骨神经、神经根或马尾神经,患者出现腰部疼痛,牵连股部,下肢足部放射性疼痛,引起神经功能、运动功能障碍,特定身体部位出现麻痹或瘫痪症状。良好的腰椎间盘突出动物模型的建立,可以生动直观的帮助医疗工作者理解腰椎间盘突出压迫神经后,神经的病理生理变化以及疾病的发***展规律,并可以通过成熟的动物模型,探索有效的***方法。近年来,随着对腰椎间盘突出症的认识研究的不断深化,人们希望通过建立一种可靠、有效的腰椎间盘突出的动物模型,通过施加干预因素,更加准确地观察模型体内产生的变化,探究人体内疾病发生机理,并将研究成果推广到临床,为***腰椎间盘突出症提供合理、有效的防治手段。因此。通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。
葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型:1、动物模型名称:葡聚糖硫酸钠(DSS)致溃疡性结肠炎小鼠模型2、实验动物种属:BALB/c小鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年鼠5、实验动物体重:18g-22g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:实验前小鼠禁食不禁水24h,24小时后提起鼠尾将其悬空,使挣扎以排出大肠远端的大便。小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,连续14天。进行疾病活动指数(DAI)的评估、取结肠进行组织病理学检查。2、检测标准:DAI评分明显升高,与对照组比较具统计学意义。结肠病理镜检可见结肠炎症、病变深度、隐窝破坏、溃疡病变.小鼠是人类疾病理想的动物模型不仅因为小鼠在生理上与人类极为相似而且小鼠的遗传资源非常丰富。普陀区裸鼠疾病动物模型建模
利用动物疾病模型来研究人类疾病可以克服平时一些不易见到不便于在病人身上进行实验的人类疾病的研究。浦东新区疾病动物模型建模供应商
步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。浦东新区疾病动物模型建模供应商